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武汉丹龍鸽业 
地 区：湖 北 文章总数：22篇 推荐篇数： 0篇 留言数量：1条 访问次数： 鸽舍积分： 92   建立时间：2008-1-22  |
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高碘对小鼠的脑损伤及DHA 和EPA 的拮抗效应
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作者：武汉丹龍鸽业
来源：原创
阅读：次
分类：收藏文章
发布时间：2008-1-29 16:10:00
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高碘对小鼠的脑损伤及DHA 和EPA 的拮抗效应
谭红高兴娟杨立伟
【摘要】目的观察二十二碳六烯酸(DHA) 和二十五碳烯酸( EPA) 对高碘所致的脑蛋白质、核酸代谢和
bcl- 2、bax 基因表达损伤的拮抗效应。方法体质量10 ~ 14 g 的昆明种小鼠随机分为适碘组( IN) 、高碘组( IE)
和高碘加DHA 和EPA 组( IEDE) 。IN 组动物饮含碘量为50 μg /L 的去离子水, IE 组和IEDE 组饮含碘量为
3 000 μg/L 的去离子水, IN 和IE 组动物用普通鼠饲料喂养, IEDE 组动物用每公斤含DHA 200 mg 和EPA 100
mg 的鼠饲料喂养。90 d 后雌雄2 ∶1 合笼, 仔鼠继续用亲代喂养条件喂养, 30 d 后处死仔鼠, 称全脑和海马组织
质量, 测大脑蛋白质、DNA、RNA 含量和bcl- 2、bax 基因表达量。结果IE 组动物脑和海马组织质量、蛋白质、
DNA、RNA 数量和bcl- 2 基因表达均显著低于IN 组, bax 基因表达则高于IN 组, IEDE 组脑和海马质量、蛋白
质、DNA、RNA 含量与IN 组差异无统计学意义, 但bcl- 2 表达低于IN 组, bax 表达高于IN 组, 而与IE 组差异无
统计学意义。结论高碘能干扰脑蛋白质和核酸代谢及bcl- 2、bax 基因表达, 使脑质量下降, DHA 和EPA 可拮
抗高碘所致的脑蛋白质和核酸代谢的紊乱, 对高碘引起的bcl- 2、bax 基因表达变化未见明显的调整作用。
【关键词】高碘; 蛋白质和核酸代谢; 二十二碳六烯酸; 二十五碳烯酸; 基因表达
研究表明, 高碘不仅可以引起高碘性甲状腺肿, 还可以对神经、生殖, 甚至某些基因表达产生不良影响[1- 3]。研究还发现, ω- 3 系多不饱和脂肪酸, 特别是二十二碳六烯酸(DHA) 和二十五碳烯酸( EPA)对于稳定细胞膜的结构, 防止细胞膜被氧化破坏, 促进机体和神经系统发育和智力增长有重要作用[4, 5]。本研究是在已往的研究基础上, 进一步探讨高碘对脑代谢的干扰作用和DHA、EPA 拮抗高碘作用的效果, 以期找到防治高碘损伤的办法。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组:
选用体质量10 ～14 g 的昆明种小鼠90 只( 雌60 只、雄30 只, 由河北省实验动物中心提供) , 随机分为适碘组( IN) 、高碘组( IE)和高碘+ DHA + EPA 组( IEDE) 。IN 组动物饮用碘酸钾配制的含碘量为50 μg/L 的去离子水, IE 组动物饮用含碘量为3 000 μg/L 的高碘水, IN 和IE 组
动物饲全价普通鼠饲料, IEDE 组动物饮含碘量为3 000 μg/L 的高碘水, 用每公斤含DHA 200 mg、
EPA 100 mg 的全价鼠饲料喂养。90 d 后各组动物雌雄按2 ∶1 合笼, 所生仔鼠继续用亲代的喂养条件喂养, 30 d 后处死仔鼠, 取全脑和海马组织称重,测大脑蛋白质、DNA、RNA 含量, bcl- 2 和bax 基因表达量。
1.2 主要仪器和试剂:
含DHA 和EPA 的浓缩鱼油由威海达因海洋生物制药公司提供, 鼠抗人bcl- 2单克隆抗体、兔抗人多克隆抗体、羊抗鼠FTTCIgG、羊抗兔FTTC- IgG 二抗均购自Santa Cruz 公司, 溴化乙锭、RNA 酶购自Sigma 公司, 流式细胞仪为美国BD 公司FAC- 420 型, 分光光度计为国产UV- 9100 型, 其他试剂均为国产分析纯级。
1.3 大脑蛋白质和DNA、RNA 的测定:
用紫外分光光度法测定DNA 和RNA[6] , 按Schmidt- Thannhauser-Schneider 法提取, 蛋白质测定采取改良酚试剂法。
1.4 脑bcl- 2 和bax 基因表达的检测:
用流式细胞仪检测, 具体方法参考文献[ 7, 8] 进行。
1.5 数据处理: 用SPSS 统计软件进行方差分析。
2 结果
2.1 30 日龄各组仔鼠全脑和海马组织称重结果:
由表1 可见, IE 组仔鼠脑和海马质量显著低于IN和IEDE 组
2.2 30 日龄各组仔鼠脑蛋白质、DNA、RNA:
由表2可见, IE 仔鼠脑蛋白质、DNA、RNA 均显著低于IN和IEDE 组。表2 30 日龄各组仔鼠脑蛋白质、DNA、RNA 比较( x!±s)
2.3 30 日龄各组仔鼠脑bcl- 2 和bax 基因表达结果:
由表3 可见, IE 组、IEDE 组, bcl- 2 表达均显著低于IN 组, 而bax 表达则显著高于IN 组。
表3 30 日龄各组仔鼠脑bcl- 2 和bax 基因表达比较( x!±s)Table 3 Compar ison of expr ession of bcl- 2 and bax genein the br ains of mice aging 30 days among groups( x!±s)
3 讨论
目前高碘对甲状腺之外的其他组织的损伤尚无完全一致的意见。本课题组的多批实验发现, 3 000μg/L 以上的高碘3 个月以上, 不仅可致甲状腺肿,还会对脑、肾以及胚胎发育、甚至基因表达造成不良影响。为了取得更多的实验资料, 特别是为了观察多不饱和脂肪酸能否对高碘所致的机体损伤有拮抗效应, 以期提出高碘对机体损伤的防护方法。研究结果表明, 高碘可干扰脑蛋白质和核酸的代谢, 使脑质量减轻并能使bcl- 2 和bax 基因表达发生改变, 而DHA 和EPA 可拮抗高碘对脑蛋白质、核酸代谢的不良影响, 但对高碘引起的bcl- 2 和bax基因表达改变无明显地调整作用。高碘干扰脑蛋白质、核酸代谢和bcl- 2、bax 基因表达的机理尚不清楚, 可能与高碘抑制神经系统某些代谢酶的活性有关, 因为已发现高碘可抑制脑组织神经元特异的烯醇化酶(NSE) 活性[9]。已知
bcl- 2 基因表达蛋白对神经细胞有保护作用, 可减少刺激引起的细胞凋亡, bax 表达蛋白则相反[10]。高碘既干扰脑蛋白和核酸的代谢又使bcl- 2 表达减少, bax 表达增强, 二者之间可能有内在联系即bcl- 2表达减少、bax 表达增强可能是引起脑细胞损伤, 蛋白质和核酸数量下降, 以及脑质量减轻的原因之一。多不饱和脂肪酸, 特别是DHA、EPA 具有稳定细胞膜结构, 防止细胞膜遭氧化破坏、以及促进神经系统发育和智力增长等作用, 多不饱和脂肪酸这些生物学作用可以解释本研究发现的, DHA、EPA 可减轻, 甚至完全消除高碘对脑蛋白质和核酸代谢的干扰作用。本研究未观察到DHA 和EPA 能拮抗高碘所致的bcl- 2 和bax 基因表达改变, 不知是因为观察时间较短, 还是另有其他原因, 有待进一步研究。
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