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革兰氏染色操作方法 上一篇    下一篇
作者:河南郑州金羽  来源:转载   阅读:  分类:收藏文章  发布时间:2015-1-31 7:03:07  
  革兰氏染色操作方法
1.涂片:取一洁净载玻片,滴一小滴生理盐水于载玻片中央,按无菌操作要求,先用接种杯,挑去少量某菌培养物于玻片中央水滴中涂布均匀。要求涂片薄而无均匀,使其自然干燥。
2.干燥、固定:涂片干燥后,快速通过火焰2-3次,进行固定。固定时不可过热,以载玻片不烫手为宜。
3.染色:
a.初染:滴加结晶紫染色液覆盖玻片涂布区,染色1分钟,用水冲洗。
b.媒染:滴加革兰氏碘冲去残水,并覆盖1分钟,水洗。
c.脱色:甩净载玻片上面的水分,倾斜玻片,并衬以白纸,,用95%乙醇滴洗至无紫色退下为止,时间20-30S。立即用水缓缓冲洗,注意脱色时间不宜过长,以免呈现假阴性。
d.复染:滴加番红染色液,染色3-5分钟,水洗。待其自然干燥,镜检。革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

  

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